Kaiser测试是基于茚三酮与胺的反应。这是一个非常敏感的伯胺测试,由一个强烈的蓝色显示,有些不太适合的仲胺,是由一个棕红色的显色检测。通常的颜色主要是在珠和部分在上清液;但对未反应的氨基基团的颜色必须彻底转移为了解决[ 143 ]量的光谱定量测定。颜色的强度取决于氨基末端的性质进行检测,得到的N-末端是相当非特异性的色调(侧链保护!)天冬氨酸,天冬酰胺,丝氨酸,半胱氨酸,苏氨酸。棕红色的珠子,结果与N-末端。作为树脂样品被加热,“隐藏”的NH2基团可能变得更容易,从而检测。然而,长时间加热以及应避免过热可能导致赖氨酸(BOC)解理或Fmoc去除(吡啶)。
解决方案1:5克茚三酮在100毫升乙醇
解决方案2:80克苯酚在20毫升乙醇
解决方案3:2毫升0.001米水98毫升氰化钾吡啶
一些树脂珠被放置在一个小的测试管增加了2–每5溶液滴。管放在烤箱里反应留下来发展为5分钟,在100°C.
树脂和溶液的蓝色(可变强度–由浅到深蓝色):正面的,
树脂和溶液无色到黄色:负。
改进的Kaiser测试已开发的耦合定量监测 |